|
МЕТОДИЧЕСКАЯ РАЗРАБОТКА
УНИВЕРСАЛЬНЫЙ МЕТОД ИНДИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ И ДИАГНОСТИКИ НА ОСНОВЕ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ С КОМПЬЮТЕРНЫМ АНАЛИЗОМ ДАННЫХ |
УРОГЕНИТАЛЬНЫЕ ИНФЕКЦИИ И ДИСБИОЗ заболевания передаваемые половым путем |
Коротко о методе
В настоящее время одним из наиболее современных, высокочувствительных, автоматизированных и перспективных способов индикации микроорганизмов, диагностики инфекций и патологических состояний является метод газовой хроматографии - масс-спектрометрии (ГХ-МС), основанный на непосредственном определении микроорганизмов из окружающей среды, биологических жидкостей и тканей организмов человека и животных. Метод позволяет идентифицировать и количественно определять микроорганизмы по наличию в биопробе специфических веществ микроорганизмов - их клеточных химических компонентов, метаболитов или продуктов их взаимодействия с клетками хозяина.
С его помощью можно проведить исследования различных составляющих микрофлоры: бактерий, грибов, вирусов, простейших и т.п.
С учетом особенностей химического состава микробного сообщества урогенитальных органов (УГТ) составлена программа анализа, включающая анализ химического состава проб крови (0,02мл), вагинальной жидкости (0,1 мл), спермы (0,5 мл) или мочи (3-5 мл) на хромато-масс-спектрометре с последующим расчетом состава микробного сообщества с помощью электронных таблиц Microsoft Excel на персональном компьютере по специальной программе.В нашей работе в настоящее время в банке данных компьютера заложены данные по 300 видам микроорганизмов общим числом до 500 штаммов.Практически проводится определение 30-40 видов микроорганизмов, характерных для УГТ.
Основное время анализа приходится на подготовку проб (примерно 3 часа), анализ - 1 час, измерение концентрацей целевых химических веществ в составе пробы-1 час. Анализ серии из 15 проб занимает 15 часов.
Анализ выполняется на современных хромато-масс-спектрометрах фирм Хьюлетт-Паккард (США) и Шимадзу (Япония).
ПРИМЕР 1
Результаты исследования видового состава микрофлоры вагинальной жидкости методом газовой хроматографии - масс-спектрометрии.
Проба VF-417. Ф-а. Повторный анализ.
ДО ЛЕЧЕНИЯ
Не обнаружены, т.е. содержание не превышает 1000 кл/мл : Haemophylus, Treponema, Candida, Mycobacteria.
Полученный состав отличается от нормы повышенным содержанием
Bacillus, Staphylococcus, Streptomyces а также наличием гонококка и хламидий. Сильно занижено содержание лактобацилл.ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ
(подавление гонококка и хламидий)Не обнаружены, т.е. содержание не превышает 1000 кл/мл: Haemophylus, Treponema, Candida, Neisseria gonorrhoae.
По сравнению с предыдущим анализом на порядок уменьшилось количество хламидий, бацилл и энтеробактерий.
Активизировались и преобладают в микрофлоре микроскопические грибы,
анаэробный пептострептококк, микобактерии, клостридии и Propionibacterium.Это характерное замещение микрофлоры после применения антибиотиков селективного действия.
Микст-инфекция при молочнице
Пример 2
Результаты исследования состава микрофлоры вагинальной жидкости по липидным маркерам методом газовой хроматографии - масс-спектрометрии.
Проба vf-962. Ту-ва
Существенно превышают норму содержание маркеров
Candida albicans, Clostridium perfringens, энтеробактерий (предположительно Serratia), клебсиелл при наличии эубактерий и Helicobacter pylory.При назначении лечения следует обратить внимание на одновременное присутствие
Candida albicans и Clostridium perfringens. Оба эти организма вызывают клинические проявления "молочницы". Кроме того, необычным является наличие маркера Helicobacter pylory, который обычно связан с язвой желудка.Пример 3
Результаты исследования состава микрофлоры вагинальной жидкости методом газовой хроматографии - масс-спектрометрии.
Проба vf-786. И-ва.
Ведущими микроорганизмами в микрофлоре пробы в сравнении с нормой являются
Сlоstridium perfringens и Klebsiella. Это типичный пример подмены обычного микробного агента при молочнице - Candida albicans на Сlоstridium perfringens. В таких случаях противогрибковые препараты, назначаемые при кандидозе, не оказывают терапевтического эффекта.Клостридии группы C.perfringens выделяют летучие жирные кислоты, вспенивая секрет слизистой и создавая эффект, характерный для молочницы.
Геликобактер в вагине?
Пример 4
Результаты исследования состава микрофлоры вагинальной жидкости методом газовой хроматографии - масс-спектрометрии.
Проба vf-772. А-н.
Обнаружены признаки хламидий.
Ведущими микроорганизмами в составе микрофлоры пробы являются Candida albicans и Helicobacter pylory.
|
?? |
Вопрос к специалистам: есть ли сведения об обнаружении Helicobacter pylori в половых органах женщин? |
Этот микроорганизм является возбудителем язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Нигде кроме этих органов он ранее не обнаруживался. Однако этого могло не произойти вследствии чрезвычайной
сложности определения H.pylori традиционными методами. Масс- спектрометрически это делать просто, так как он имеет четкий маркер - гидроксиоктадекановую кислоту, которую другие клинические микроорганизмы и клетки человека не производят.
Гонококк и анаэробная инфекция
Пример 5
Результаты исследования состава микрофлоры вагинальной жидкости по липидным маркерам методом газовой хроматографии - масс-спектрометрии.
Проба vf-953. З-ва.
Обнаружены химические маркеры
гонококка - 3-гидроксидодекановая кислота в определенном соотношении с гидроксимиристиновой и при отсутствии 2-гидроксидодекановой.
Превышают норму содержание маркеров Clostridium perfringens.
Обнаружено высокое содержание маркеров Bacteroides fragilis и
B.urealyticum, Fusobacterium, Bacillus, Peptostreptococcus anaerobius и Propionibacterium.Это группа анаэробных бактерий
(кроме Bacillus)Кроме того несколько завышены по сравнению с нормой содержание маркеров Klebsiella и коринеформных бактерий.
|
|